Paling rawan kanggo gagal lan solusi HPLC

Minangka instrumen tliti dhuwur, HPLC bisa gampang mimpin kanggo sawetara masalah cilik troublesome yen ora dilakokno ing cara sing bener sak nggunakake.Salah sawijining masalah sing paling umum yaiku masalah kompresi kolom.Carane cepet ngatasi masalah kromatografi sing salah.Sistem HPLC utamane kasusun saka botol reservoir, pompa, injektor, kolom, ruang suhu kolom, detektor lan sistem pangolahan data.Kanggo kabeh sistem, pilar, pompa lan detektor minangka komponen utama lan lokasi utama sing rawan masalah.

Tombol kanggo tekanan kolom yaiku area sing kudu digatekake nalika nggunakake HPLC.Stabilitas tekanan kolom ana hubungane karo wangun puncak kromatografi, efisiensi kolom, efisiensi pemisahan lan wektu retensi.Stabilitas tekanan kolom ora ateges nilai tekanan stabil ing nilai sing stabil, nanging sawetara fluktuasi tekanan antarane 345kPa utawa 50PSI (ngidini nggunakake elusi gradien nalika tekanan kolom stabil lan owah-owahan alon).Tekanan sing dhuwur banget utawa sithik banget minangka masalah tekanan kolom.

Paling rawan kanggo gagal lan solusi HPLC

1, tekanan dhuwur minangka masalah sing paling umum ing panggunaan HPLC.Iki tegese mundhak dadakan ing tekanan.Umumé, ana alesan ing ngisor iki: (1) Umumé, iki amarga penyumbatan saluran aliran.Ing titik iki, kita kudu nliti piecewise.a.Pisanan, potong inlet pompa vakum.Ing wektu iki, tabung PEEK diisi karo cairan supaya tabung PEEK luwih cilik tinimbang botol pelarut kanggo ndeleng manawa cairan kasebut netes.Yen cairan ora netes utawa netes alon, sirah panyaring pelarut diblokir.Perawatan: Rendhem ing 30% asam nitrat kanggo setengah jam lan mbilas nganggo banyu ultrapure.Yen cairan netes kanthi acak, sirah panyaring pelarut normal lan dipriksa;b.Bukak tutup Purge supaya fase seluler ora ngliwati kolom, lan yen tekanan ora dikurangi sacara signifikan, filter putih diblokir.Perawatan: Saring whiteheads dibusak lan sonicated karo 10% isopropanol kanggo setengah jam.Kanthi asumsi yen tekanan mudhun ing ngisor 100PSI, sirah putih sing disaring normal lan dipriksa;c.Copot ujung metu saka kolom, yen tekanan ora suda, kolom diblokir.Perawatan: Yen penyumbatan uyah buffer, bilas 95% nganti tekanan normal.Yen alangan disebabake sawetara materi sing luwih dijaga, aliran sing luwih kuat tinimbang fase seluler saiki kudu digunakake kanggo cepet-cepet menyang tekanan normal.Yen meksa reresik long-term ora suda miturut cara ndhuwur, welingan lan stopkontak kolom bisa dianggep disambungake menyang instrument ing nalisir, lan kolom bisa di resiki karo phase seluler.Ing wektu iki, yen tekanan kolom isih ora suda, piring sieve ngleboke kolom mung bisa diganti, nanging yen operasi ora apik, iku gampang kanggo mimpin kanggo abang saka efek kolom, supaya nyoba kanggo nggunakake kurang.Kanggo masalah angel, panggantos kolom bisa dianggep.

(2) Setelan tingkat aliran sing salah: Tingkat aliran sing bener bisa direset.

(3) Rasio aliran sing ora bener: indeks viskositas saka proporsi aliran sing beda-beda, lan tekanan sistem sing cocog karo aliran kanthi viskositas sing luwih dhuwur uga luwih gedhe.Yen bisa, pelarut viskositas sing luwih murah bisa diganti utawa disetel maneh lan disiapake.

(4) Tekanan sistem nol drift: nyetel nol sensor level cairan.

2, meksa banget kurang (1) biasane disebabake bocor sistem.Apa apa: Golek saben sambungan, utamané antarmuka ing loro ends saka kolom, lan ngencengi wilayah bocor.Copot kirim lan ngencengi utawa garis film PTFE karo pasukan cocok.

(2) Gas mlebu pompa, nanging tekanan biasane ora stabil ing wektu iki, dhuwur lan sithik.Luwih serius, pompa ora bakal bisa nyerep cairan kasebut.Cara perawatan: mbukak tutup reresik lan ngresiki ing tingkat aliran 3 ~ 5ml / min.Yen ora, gelembung udara disedot ing katup exhaust nggunakake tabung jarum khusus.

(3) Ora ana aliran metu fase seluler: priksa manawa ana fase seluler ing botol reservoir, apa sink kacemplungake ing fase seluler, lan apa pompa mlaku.

(4) Katup referensi ora ditutup: tutup referensi ditutup sawise deceleration.Biasane mudhun dadi 0.1.~ 0.2mL / min sawise nutup tutup referensi.

Ringkesan:

Ing makalah iki, mung masalah umum ing kromatografi cair sing dianalisis.Mesthine, ing aplikasi praktis, kita bakal nemoni masalah liyane.Ing penanganan fault, kita kudu tindakake prinsip ing ngisor iki: mung ngganti siji faktor ing wektu kanggo nemtokake hubungan antarane faktor hipotetis lan masalah;Umumé, nalika ngganti bagean kanggo ngatasi masalah, kita kudu mbayar manungsa waé kanggo nyelehake bagean utuh dismantled maneh kanggo nyegah sampah;Nggawe pakulinan rekaman sing apik minangka kunci sukses penanganan kesalahan.Kesimpulane, nalika nggunakake HPLC, penting kanggo menehi perhatian marang pretreatment sampel lan operasi lan pangopènan peralatan sing tepat.